產(chǎn)品詳情
簡(jiǎn)單介紹：
肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)測(cè)試盒由上海通蔚科研生物公司提供，通蔚商鋪產(chǎn)品包括肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)含量檢測(cè)試劑盒價(jià)格; 規(guī)格; 包裝; 說明書; 測(cè)定方法等生化試劑盒的詳細(xì)介紹，歡迎新老客戶前來(lái)選購(gòu)。
詳情介紹：
肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)測(cè)試盒
測(cè)定方法: 微量法
測(cè)定規(guī)格: 100管/96樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意 : 正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶是存在于線粒體內(nèi)膜的一類酰基轉(zhuǎn)移酶?？赡娴卮呋瘡孽；o酶A將?；D(zhuǎn)移至L-肉毒堿的反應(yīng),在轉(zhuǎn)運(yùn)脂肪酸通過線粒體內(nèi)膜的過程中起重要作用。測(cè)定原理:
基于肉堿和脂酰輔酶A在丙二酰輔酶A存在與否的條件下,通過肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CPT-I)的作用,產(chǎn)生脂酰肉堿,并釋放出巰基輔酶A(COA-SH),與Ellman試劑DN-TB反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的TNB。通過其吸收峰值得變化(412nm),來(lái)定量分析CPT-1的活性。需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、無(wú)水乙醇和蒸餾水樣本的前處理:
組織、或細(xì)胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離:
①稱取約0.1g組織或收集500萬(wàn)細(xì)胞,加入1mL試劑一和10uL 試劑三,用冰浴勻漿器或研缽勻漿。
②將勻漿液于600g,4℃離心5min。
③棄沉淀,將上清液移至另一離心管中,11000g,4℃離心10min。
④上清液即胞漿提取物,可用于測(cè)定從線粒體泄漏的CPT-1(此步可選做)。
⑤在步驟④的沉淀中加入200uL試劑二和2uL 試劑三,超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3秒,間隔10秒,重復(fù)30次),用于線粒體CPT-1測(cè)定。
