丙二醛(MDA)測(cè)試盒
測(cè)定方法: 微量法
測(cè)定規(guī)格: 100管/96樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意 : 正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
氧自由基作用于脂質(zhì)的不飽和脂肪酸,后者逐漸分解為一系列復(fù)雜的化合物,其中包括MDA。通過(guò)檢測(cè)MDA的水平即可檢測(cè)脂質(zhì)氧化的水平。
測(cè)定原理:
MDA與硫代酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在532nm有 吸收峰,進(jìn)行比色后可估測(cè)樣品中的含量;同時(shí)測(cè)定600nm下的吸光度,利用532nm與600nm下的吸光度的差值計(jì)算MDA的含量。
MDA提取:
1、細(xì)胞或組織樣品的制備:
或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)或細(xì)胞加入1mL提取液),超聲波破碎或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。