淀粉磷酸化酶(SP)測試盒
測定方法: 分光光度法
測定規(guī)格: 50管/48樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意: 正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP)是淀粉代謝過程 的可逆反應酶,既可催化淀粉的合成,也可催化淀粉的分解。在高等植物中,淀粉磷酸化酶(合成方向)主要存在于質體中,負責延長淀粉的 α-1,4-葡萄糖鏈的非還原末端;淀粉磷酸化酶(分解方向)主要存在于細胞質基質中,催化淀粉中的 α-1,4-糖苷鍵磷酸解產生葡萄糖-1-磷酸,負責葡萄糖鏈的磷酸解,是淀粉代謝過程中的關鍵酶。在植物體中,淀粉磷酸化酶分解方向的底物無機磷濃度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸濃度幾乎高了兩個數量級,一般認為淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解,因此,分解方向的淀粉磷酸化酶具有重要測定意義。
測定原理:
淀粉磷酸化酶催化淀粉中的 α-1,4-糖苷鍵與無機磷反應產生葡萄糖-1-磷酸,葡萄糖-1-磷酸在磷酸葡萄糖變位酶的作用下產生葡萄糖-6-磷酸,并在 6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化下還原 NADP+產生 NADPH,使 340nm下吸光值增加。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 50mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1 瓶,-20℃保存;臨用前加入 3mL 水溶解,用不完的試劑分裝后-20℃保存;試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存;臨用前加入 3mL 水溶解,用不完的試劑分裝后-20℃保存。