產(chǎn)品詳情
簡(jiǎn)單介紹：
CTAB法植物基因組DNA提取試劑盒本試劑盒適用于從多種植物的不同組織中快速提取高質(zhì)量的基因組DNA，特別適用于多酚、多糖含量高的植物組織和植物干粉。吸附柱中獨(dú)特的硅基質(zhì)材料和相應(yīng)的緩沖液能有效去除植物組織中的多糖、多酚復(fù)合物和酶抑制劑，基因組DNA在高鹽狀態(tài)下選擇性吸附于硅基質(zhì)膜上，再通過快速的漂洗、離心步驟，去除其他雜質(zhì)，低鹽的洗脫緩沖液將純凈的基因組 DNA 從硅基質(zhì)膜上洗脫下來。使用本試劑盒提取的植物基因組 DNA，可直接進(jìn)行 PCR、酶切和雜交等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
詳情介紹：
產(chǎn)品及特點(diǎn)
本試劑盒適用于從多種植物的不同組織中快速提取高質(zhì)量的基因組DNA，特別適用于多酚、多糖含量高的植物組織和植物干粉。吸附柱中獨(dú)特的硅基質(zhì)材料和相應(yīng)的緩沖液能有效去除植物組織中的多糖、多酚復(fù)合物和酶抑制劑，基因組DNA在高鹽狀態(tài)下選擇性吸附于硅基質(zhì)膜上，再通過快速的漂洗、離心步驟，去除其他雜質(zhì)，低鹽的洗脫緩沖液將純凈的基因組 DNA 從硅基質(zhì)膜上洗脫下來。使用本試劑盒提取的植物基因組 DNA，可直接進(jìn)行 PCR、酶切和雜交等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
它具有下列特點(diǎn)：
它具有下列特點(diǎn)：
1. 簡(jiǎn)便快速：1 小時(shí)內(nèi)可獲得高純度的基因組 DNA。
2. 純度高：可直接進(jìn)行 PCR、酶切和雜交等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
3. 應(yīng)用廣泛，可應(yīng)用于多種植物的多種組織，特別適合于多糖、多酚含量高的植物及干粉。
成分規(guī)格
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Buffer GP1 |
40ml |
80ml |
160ml |
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Buffer GP2 |
40ml |
80ml |
160ml |
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Buffer W1（concentrate） |
21ml |
42ml |
84ml |
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Buffer W2（concentrate） |
15ml |
30ml |
60ml |
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Buffer EB |
10ml |
10ml |
30ml |
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Spin Column with Collection Tubes |
50套 |
100套 |
200套 |
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室溫（15 - 25℃），可保存 12 個(gè)月 |
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本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于其它用途 |
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使用方法
（注 意：使用前在 BufferGP1 中加入β-巰基乙醇，使其終濃度為 0.2%，水浴鍋中65°C預(yù)熱）
1. 取植物新鮮組織約 100 mg 或干組織約 30 mg，加入液氮充分研磨。
（注 意：如果組織為較幼嫩部分，可不用液氮研磨，直接在研缽中加入700μl Buffer GP1 和組織一起研磨即可）
2. 將研磨后的粉末收集到一離心管（自備）中，加入700 ul 65℃預(yù)熱的Buffer GP1（使用前在預(yù)熱的 Buffer GP1 中加入β-巰基乙醇，使其終濃度為 0.2%），迅速顛倒混勻或用渦旋振蕩器充分振蕩混勻，然后將離心管置于65°C 水浴 20 min，期間每隔3 - 5 min顛倒離心管混勻樣品一次。
（注 意：如要去除 RNA，可在上述步驟完成后加入濃度為 100mg/ml 的 RNaseA 4 μl，振蕩混勻，室溫處理 5-10min）
3. 加入 700 μl 氯仿，充分混勻，12,000 rpm 離心 5 min。
（注 意：如果提取的植物材料富含多酚或淀粉，可在第 3 步驟前用酚：氯仿/1：1 進(jìn)行等體積抽提）
4. 小心將上層水相轉(zhuǎn)入一新的離心管（自備）中，加入 700 μl Buffer GP2，充分混勻。將混勻后的溶液轉(zhuǎn)入離心吸附柱中，若一次不能轉(zhuǎn)移完成，可分次加入，12,000rpm離心 30 sec，棄收集管中廢液。
5. 向吸附柱內(nèi)加入 500 μl 的 Buffer W1，室溫 12,000 rpm 離心30 sec，棄收集管中廢液。
（注 意：Buffer W1 是濃縮液，按要求加入乙醇，用后及時(shí)蓋緊，以防乙醇揮發(fā)）
6. 向吸附柱內(nèi)加入 500 μl 的 Buffer W2，室溫 12,000 rpm 離心30 sec，棄收集管中廢液。
（注 意：Buffer W2 是濃縮液，按要求加入乙醇，用后及時(shí)蓋緊，以防乙醇揮發(fā)）
7. 重復(fù)步驟 7 一次。
8. 室溫 12,000 rpm 離心 2 min，甩干吸附柱上的殘留液體。（注意：此步不能省略，否則殘留乙醇會(huì)影響基因組 DNA 的后續(xù)使用）
9. 將離心吸附柱置于一個(gè)新的 1.5 ml 塑料離心管（自備）中，加入50-100 μl Buffer EB，室溫放置 2 min。12,000 rpm 離心 2 min，離心管底溶液即基因組DNA。
（注 意：為增加洗脫效率，可將洗脫液在 50-60°C 預(yù)熱。如需使用去離子水洗脫，可用NaOH調(diào)整其pH 值在 7.0-8.5 之間，為了增加 DNA 回收率，可將得到的溶液重新加入到離心管中，室溫放置2min，再次離心收集）
